培养条件
培养基:DMEM/F12+10%FBS
气相:空气,95%;二氧化碳,5%
温度:37℃
细胞描述
细胞生长:贴壁生长
细胞形态:Cobblestone appearance with large dark nuclei; during proliferation, cells are small and evenly sized, display a high mitotic index and show no presence of smooth muscle cells.
细胞数量:1×106个
细胞传代:1:2~1:4传代;2~3天换液1次
细胞说明:Human Umbilical Vein Endothelial Cells.
细胞纯度:93%
细胞活力: >90%
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
细胞冻存:液氮冻存(基础培养基+10%DMSO+10%FBS)
细胞运输:干冰运输(1管)/ T-25培养瓶一瓶
细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
细胞传代方法:
显微镜下观察细胞,当覆盖80%底面积时,进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖100%的时候才传代,那样细胞容易老化。
在生物安全柜或者超净台中,将培养瓶中的培养基倒到废液缸中
用PBS或者生理盐水洗一遍
加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培养箱中消化3-5分钟
然后取出细胞,加入5ml培养基,吹打均匀后,转移到15ml离心管中,1000rpm 离心5分钟
离心后,去掉上清,用新鲜培养基重悬细胞,按照1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏方法:
取出冻存管后,投入37℃水浴中,震荡解冻2 min
酒精消毒管壁外侧后,将其转入超净台中,将管内细胞转移至离心管中,加入9 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基
将离心管离心(1000rpm,5 min)
弃去上清,再加入5ml DMEM/F12+10%FBS完全培养基,转入T-25培养瓶中培养。
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细胞图片